小奕说药 | siRNA双链在液相色谱中的稳定性研究
研究背景siRNA双链稳定性常用熔解温度(Tm)衡量。即双链中有一半解离为互补单链或一半二级结构线性化时的温度,Tm越高,核酸双链或二级结构越稳定。在液相色谱分析中,变性条件(高于Tm)常用于确保寡核苷酸的可预测保留行为,避免分子内和分子间相互作用干扰;而非变性条件则适用于特定分析需求,如双链限制性片段的尺寸测定和siRNA双链中单个链成分的量化分析,可避免单链峰的假阳性检测。目前,siRNA双链的Tm可通过在线计算器预测,但这些计算器仅适用于水溶液和有限缓冲液体系,无法考虑离子对缓冲液和有机改性剂等色谱常用试剂对Tm的影响。同时,液相色谱分离条件(流动相组成、固定相类型等)对siRNA双链稳...
Time:2026年04月03日 11:16:54 Read:176℃