新版GMP附录1早已全面落地，无菌生物净化验证的核心要求，从“达标即可”升级为数据可量化、风险可预判、工艺可优化。但目前多数药企的生物净化验证，仍单一依赖传统BIs生物指示剂的二元判定模式，本质是靠经验、靠运气“赌合规”，也是核查缺陷、验证阳性、工艺漂移频发的核心根源。

新规中对生物净化验证的合规逻辑彻底收紧，核心法规底线明确：

✅企业需完整掌握生物净化工艺原理、参数，建立可落地、可解释、可追溯的全套验证体系；

✅保障无菌核心区域无活微生物残留；

✅ 全过程精细化管控：实现去污全流程、全点位可控；

✅ 验证闭环长效合规：所有净化工艺完成全套验证，持续满足无菌风控要求。

在常态化药监合规核查要求下，传统BIs的短板被进一步放大：

你是否也遇到这些难题？

• BI偶尔阳性，无法判定：是流氓BI（Rogue BI）、D值选型不当，还是循环开发CD不完整？

• 验证周期极长，需等待7天培养结果，拖慢设备投产、再确认、产品放行进度

• 仅存「阳性/阴性」二元结果，无量化数据，无法预判工艺漂移、识别消杀死角

• BI批次波动大、假阳性、载量不稳定，导致验证结果失真

行业传统模式经常是Spray and Pray（喷完即开始祈祷），这些偏移的风险长时间没有被解决，这并不符合新版法规「数据驱动、风险可控」的核心要求。

面对新版附录1的合规压力，行业主流解决方案分为两类：

1. 选用高稳定性BI产品（如SKAN BI，流氓BI占比＜0.05%），降低耗材本身误差；

2. 采用EI酶指示剂技术辅助全流程验证，彻底解决传统BI的滞后性、无数据、难溯源痛点。

相较于BI长达7天的培养等待，EI酶指示剂仅需60秒即可输出量化结果，以精准数据替代「非黑即白」的定性判定，成为新版GMP附录1下的验证最优解。

✅ EI核心优势：告别盲目验证，全程数据可控

• 分秒级出结果：无需培养，60秒快速出数据，大幅缩短循环开发、PQ确认、偏差排查周期

• 批次高度稳定：工业化标准化生产，批间差异极低，规避BI孢子载量波动问题

• 全量化可追溯：RLU数值直观量化净化效果，精准预警工艺漂移

• 合规性完备：适配GMP规范、支持21 CFR Part 11电子数据溯源

EI（Enzyme Indicator）酶指示剂核心依托热稳定性腺苷酸激酶tAK技术，是目前全球无菌去污验证领域最成熟的定量检测体系。

技术逻辑闭环：

1. EI载体搭载稳定tAK酶蛋白，接触汽化过氧化氢后，酶活性随消杀强度梯度衰减；

2. 验证结束取出EI，通过荧光素/荧光酶生化反应，将酶活性转化为光学信号；

3. 检测仪读取RLU相对荧光单位：数值越低，灭活越彻底，净化效果越好；

4. 配套ATHENA™合规软件，自动生成数据报表、趋势图谱，满足审计追溯要求。

1. 出厂QC质控：极低批间波动，数据可信度拉满

通过60支空白EI样本测试验证产品稳定性，如下图：

• 有效阳性检出率95%~100%，完全达标

• 平均RLU值：9.09×10⁷      （允许数值区间：6.00×10⁷ ~ 1.64×10⁸）

• 变异系数CV=9.90%，（允许数值=<15%）

对比传统BI（CV普遍＞20%），EI彻底解决耗材本身波动导致的验证偏差，从源头保证数据真实可靠。

2. 现场实测：可视化定位净化死角，精准优化工艺

以四腔体隔离器41点位全覆盖测试为例，EI可直观呈现腔体全域消杀分布：

• 红色线（6log）：GMP法规最低合格底线。

  高于红线的点位：RLU 数值过高，过氧化氢浓度不足，是工艺最差挑战点，需要优化装载、气流布局等。

• 黄色线（8log）：

  低于黄线的点位，RLU 数值较低，消杀效果充足。

• 黄线~ 红线之间的点位，RLU 数值达标，但冗余不足，温湿度、装载影响发生工艺漂移

• 绿色线（阴性上限）：完全灭活基准，贴近绿线为最优工艺。低于绿线存在过度消杀，可精简参数、提升产能。

EI真正实现：哪里净化死角、哪里冗余、哪里可优化，数据一目了然，彻底告别传统BI盲目排查的困境。

目前Protak Scientific EI酶指示剂技术已在全球无菌领域规模化应用：

• 全球Top20药企中，75%已常态化落地应用

• 覆盖顶尖医疗机构、无菌设备OEM原厂、制药全产业链

• 国内多家知名药企已通过乐嘉文引入EI技术，用于过氧化氢生物净化的循环开发、工艺优化、偏差排查、周期性再确认

从「经验验证」到「数据验证」，EI正在推动国内生物净化验证体系，全面接轨新版GMP附录1国际合规标准。

如需深入了解Protak EIs产品详情、应用方案分析、现场测试落地等服务，可联系乐嘉文咨询对接。

邮箱：lily.l@rieckermann.com

电话：021-64728743*314

后续小编将持续分享辉瑞、阿斯利康、罗氏等国际头部药企的EIs落地应用经验，带大家借鉴行业标杆的合规与优化思路。